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超薄切片(透射電鏡)是使用超薄切片機將樹脂包埋的樣本進行切片,切片厚度一般為50-80nm左右,用無碳芳華膜銅網(wǎng)進行撈片,然后重金屬染色,常溫干燥保存
樹脂包埋(透射電鏡)實驗步驟:1、取材:電鏡取材非常嚴格,取材過程中速度要快,5分鐘內(nèi)要將組織取出放入固定液中;取材組織塊要小,一般要求將組織切成1立方毫米大小;取材部位要準確、取材溫度要低是在4℃條件下進行;取材工具要干凈,鋒利。如果是貼壁細胞不可用酶消化下來,先吸去培養(yǎng)液然后加入電鏡固定液用橡膠塊刮下細胞,離心,細胞體積保證綠豆大小即可,然后吸去上清更換固定液繼續(xù)固定。
透射電鏡全套,透射電鏡制片步驟1、 取材固定:新鮮組織確定取材部位,盡量減小牽拉、挫傷與擠壓等機械損傷,組織體積一般不超過1mm×1mm×1mm ,迅速投入電鏡固定液4℃固定2-4h。細胞離心至管底可以看到綠豆大小的細胞團塊,棄去培養(yǎng)液加入電鏡固定液4℃固定2-4h。0.1M磷酸緩沖液PBS(PH7.4)漂洗3次,每次15min。