β-半乳糖苷酶屬于糖苷水解酶,存在多種微生物來源,除了水解活性,某些來源的 β-半乳糖苷酶也具有轉糖基活性。β-半乳糖苷酶不僅在食品工業中的用途越來越廣泛,在生物技術領域如基因工程、酶工程、蛋白質工程等方面也都發揮著重要作用,并開始廣泛應用于醫藥等領域。
實驗原理:
β-半乳糖苷酶染色試劑盒是一種基于衰老時衰老相關半乳糖甘酶活性水平上調而對衰老細胞或組織進行染色檢測的試劑盒。在普通光學顯微鏡下就可以觀察到細胞或組織的衰老情況。細胞衰老被認為是生物體抑制腫瘤的一種方式,同時也是生物體老化的一種潛在原因。
β-半乳糖苷酶染色試劑盒以X-Gal為底物,在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會生成深藍色產物,光學顯微鏡下可觀察到變成藍色的表達β-半乳糖苷酶的細胞或組織。試劑盒僅染色衰老細胞,對正常培養的衰老前的細胞、靜止期細胞、永生細胞或腫瘤細胞等不會染色。
注意事項:
1. β-Gal固定液有一定的腐蝕性和毒性,操作時請注意防護。
2. β-半乳糖苷酶染色反應依賴于特定的pH條件,不能在二氧化碳培養箱中進行染色反應。較高濃度的二氧化碳會影響染色工作液的pH值,從而導致染色失敗。
3. 加入染色液后,可以用封板膜或者保鮮膜封住培養板防止蒸發。
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