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人骨成型蛋白(BMP)ELISA 試劑盒
?產品信息
【用途】
該試劑盒采用“一步"夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞或其他相關生物液體中BMP濃度。
【檢測原理】
將目標抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結合,然后加入辣根過氧化物酶標記的抗體,將未結合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
【特異性】
可檢測樣本中的BMP, 且與其它類似物無明顯交叉反應。
【重復性】
板內,板間變異系數均<10%
【批內差】
取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續測定20次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
【批間差】
選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
【精密度】
精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批間差: CV<13%
【穩定性】
經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。 為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
人骨成型蛋白(BMP)ELISA 試劑盒之ELISA常見問題
?血清血漿的區別及溶血問題
血液生化指標的分析及激素等含量的測定對臨床判斷、預測藥物毒性作用及疾病的發生發展有著重要的意義。那么,血清、血漿、全血有何區別,各自的用途是什么呢?
1、常見的血液生化指標與激素
常見的血液生化指標:GLU、ALT、AST、TP、ALB、Crc、BUN、CHO、ALP、TBIL、鎂、鈣等。
常見的激素:T、P、E2、T3、T4、FT3、FT4 等。
2、血清、血漿與血液的區別
總之,血清指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。
(2)血漿:相當于結締組織的細胞間質。是血液的重要組成分,呈淡黃色液體。血漿的化學成分中,水分占90~92%,溶質以血漿蛋白為主。血漿蛋白是多種蛋白質的總稱,用鹽析法可將其分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原三類。血漿蛋白質的功能有:維持血漿膠體滲透壓;組成血液緩沖體系,參與維持血液酸堿平衡;運輸營養和代謝物質,血漿蛋白質為親水膠體,許多難溶于水的物質與其結合變為易溶于水的物質;營養功能,血漿蛋白分解產生的氨基酸,可用于合成組織蛋白質或氧化分解供應能量;參與凝血和免疫作用。血漿的無機鹽主要以離子狀態存在,正負離子總量相等,保持電中性。這些離子在維持血漿晶體滲透壓、酸堿平衡、以及神經-肌肉的正常興奮性等方面起著重要作用。血漿的各種化學成分常在一定范圍內不斷地變動,其中以葡萄糖、蛋白質、脂肪和激素等的濃度最易受營養狀況和機體活動情況的影響,而無機鹽濃度的變動范圍較小。血漿的理化特性相對恒定是內環境穩態的首要表現。
(3)血液:血漿和懸浮其中的血細胞組成。血液是在循環系統中,心臟和血管腔內循環流動的一種組織。血液組織是結締組織的一種。
采血完畢后,血清需要在4℃靜置一段時間(1到數小時,甚至過夜)才能離心獲得。而血漿需在采血結束后,盡快離心,不需要靜置。離心速率都是在3000rpm左右,15-30min。
3、溶血的處理及原因
溶血,即血液中紅細胞因為內外界各種原因破裂,血紅蛋白逸出,導致血清、血漿由淡黃色變為血紅色。實驗過程中如果發生溶血現象,盡可能重新采血,因為溶血樣本可能會對血液中的一些生化指標和激素含量產生影響。但若無法重新采血,只能根據自身需要測量的指標,將溶血與非溶血樣本進行對照試驗,判斷是否有影響,如果無影響,即可使用溶血樣本進行試驗。
有文獻顯示,溶血后對TP、ALB、BUN、CHO、鈣、鎂等生化指標無明顯影響。對血清AST 影響顯著。其他生化指標無統計學差異。
引起溶血的原因:
1)由于抽血困難,采血時定位進針不準、針尖在血管中探來探去造成血腫等而發生溶血。
2)注射器和針頭連接不緊,采血時空氣進入,或患者(動物)緊張導致血流不暢,抽血時間過長,都會導致血標本中混有泡沫,這種混有泡沫的血標本,放置一定時間后泡沫polie或迅速干燥,造成血細胞破壞而發生溶血。
3)血標本在運輸過程中(或離心前)過度振蕩或儲存不當。
4)不合格的塑料制品會因聚合不*而具有毒性,這種毒性可造成溶血。
5)試管質量粗糙。
6)抽血消毒時,酒精未干就進行抽血。
7)操作過程中,可能引入的動物的毛發,而導致溶血。
8)盡量不要收集注射器推到最后的血,也不要使勁擠壓注射器。